PCR ანალიზი: რა არის ეს? როგორ მიიღოს PCR ანალიზი

ეს არც ისე დიდი ხნის წინ განვითარებული საიმედო, მაღალმგრძნობიარე და სწრაფი მეთოდით დიაგნოზი სხვადასხვა ინფექციური დაავადებების ადამიანებში. ასეთი მეთოდი ეწოდება "PCR ანალიზი". რა არის ეს, რა არის მისი არსი, ის, რაც შეუძლია იდენტიფიცირება მიკროორგანიზმების და როგორ უნდა მიიღოს იგი, ჩვენ აღწერს ამ სტატიაში.

ისტორია აღმოჩენის

გამოიგონა პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR) არის ამერიკელი მეცნიერი Keri Myullis 1983 წელს თავდაპირველად, დაპატენტებული მეთოდის დიაგნოზი მიერ "Cetus Corporation," რომელშიც იგი მუშაობდა და მისი შემოქმედი. მაგრამ 1992 წელს ყველა უფლება და პატენტების გაიყიდა კომპანია "ჰოფმან-ლა როშის". ამის შემდეგ, აღმოჩნდა, რომ მსგავსი კვლევა ჩატარდა პარალელურად და დაფიქსირდა სხვა აშშ ბიოლოგებს, როგორიცაა Elis Chen, დავით Edgar, ჯონ rre. 1980 წელს ჩართული ამ საკითხს და საბჭოთა მეცნიერები A. Slyusarenko A. Kaledin და S. Gorodetsky. ამიტომ, რათა დადგინდეს ერთადერთი საავტორო უფლებების მფლობელი არ ყოფილა შესაძლებელი. ბევრი გამოჩენილი ბიოქიმიკოსი, ხელი შეუწყო განვითარების მეთოდები პოლიმერაზული რეაქცია და CERN დაპატენტებული მათი ინოვაციები. ამ ეტაპზე ანალიზი PCR ხორციელდება მთელი სპეციალურად აღჭურვილი ლაბორატორიები.

მიმოხილვა PCR დიაგნოსტიკა

PCR ანალიზი: რა არის ეს და როგორ მუშაობს იგი? არსი მეთოდი მდგომარეობს იმაში, რომ გამოყენებით სპეციალური ფერმენტის დნმ პოლიმერაზას in vitro გაზრდის მოცულობა კონკრეტული მიკრობული გარემოში. ამისათვის არაერთხელ გამრავლების ხელმისაწვდომი დნმ მასალა. ამდენად, ყოფნა გამომწვევის ნიმუში თანხა გაიზრდება ხარჯზე ბიოქიმიურ ლაბორატორიაში მანიპულირება და ბაქტერიები არ იქნება რთული აღმოაჩინოს მიკროსკოპით.

როგორ არის სასწავლო მასალა?

განახორციელოს ანალიზი საჭიროა:

• დნმ template;
• პრაიმერს მასალა დამაკავშირებელი მთავრდება ფრაგმენტი;
• თერმოსტაბილური დნმ პოლიმერაზას ფერმენტის;
• ქიმიკატები, უზრუნველყოს სათანადო ოპერაციის ფერმენტები;
• ბუფერული ხსნარი არის საჭირო ქმნის სათანადო პირობების ზრდას და განვითარებას დნმ მასალა.

ასრულებს PCR მუშაობას 25-30 იმეორებს, რომელიც შედგება სამი ნაბიჯი: denaturation, annealing და დრეკადობის.

ანალიზი polimezarnoy ჯაჭვური რეაქცია გამოყენებით სპეციალური მოწყობილობა - Cycler. თანამედროვე აღჭურვილობა გაძლევთ საშუალებას დააყენოთ საჭირო გათბობის და გაგრილების მილები პროგრამის ხარვეზების აღმოფხვრას დროს დიაგნოზი.

სად მივმართოთ დიაგნოზი?

Polimezarnoy ჯაჭვური რეაქცია მეთოდი გამოიყენება სხვადასხვა სფეროში მედიცინაში:

• სასამართლო გამოყენება იდენტიფიცირება გენეტიკური მასალა, როგორიცაა თმის, ნერწყვის ან სისხლისაგან;
• PCR ანალიზი სისხლის ეხმარება გენოტიპირება, მაგ გამოვლენის ინდივიდუალური გენეტიკური დარგეს საპასუხოდ კონკრეტული პრეპარატი;
• მეთოდით მითითებული ოჯახური კავშირები ადამიანი;
• ყველაზე ცდილობდა PCR მეთოდით გახდა სამედიცინო დიაგნოზი განსაზღვრის სხვადასხვა ინფექციური დაავადებების.

რა ინფექციები ავლენს PCR?

აქედან გამომდინარე, მედიცინის უკვე დიდი ხანია წარმატებით გამოიყენება PCR ანალიზი. რა არის ის, რომ ჩვენ უკვე ვიცით. და ზოგიერთი პათოგენების შეიძლება აღმოჩენილი ეს? PCR დიაგნოზი შემდეგ ინფექციების :

• ჰეპატიტი A, B, C;
• ureaplasmosis;
• კანდიდოზი;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• ბაქტერიული ვაგინოზი;
• ინფექციური მონონუკლეოზი;
• ტრიქომონიაზის;
• HPV ინფექცია;
• ტუბერკულოზი;
• ჰერპესული ინფექციის 1-ლი და მე -2 ტიპის;
• Helicobacter pylori ინფექცია;
• ციტომეგალოვირუსი;
• დიფტერია;
• სალმონელოზი;
• აივ ინფექცია.

გარდა ამისა, PCR მეთოდები დიაგნოზი კიბოს.

მეთოდის უპირატესობები

დიაგნოსტიკური PCR აქვს რამდენიმე უპირატესობა:

1. მაღალი მგრძნობელობა. მაშინაც კი, მხოლოდ რამდენიმე დნმ-ის მოლეკულის მიკროორგანიზმის PCR ანალიზი განსაზღვრავს ინფექციის. იგი ეხმარება მეთოდი ქრონიკული და ლატენტური დაავადებების ხდება. ხშირად ასეთ შემთხვევებში, მიკროორგანიზმის დაუმუშავებელია სხვა გზები.
2. იმისათვის, რომ გამოიძიოს ნებისმიერი შესაფერისი მასალა, როგორიცაა ნერწყვი, სისხლი, სექსუალური შერჩევა, თმის, ეპითელური უჯრედები. ყველაზე გავრცელებული სისხლის ტესტი და შარდსასქესო ტამპონი PCR.

3. არ საჭიროებს გაგრძელდეს მზარდი კულტურების. ავტომატური პროცესი დიაგნოსტიკა საშუალებას აძლევს მიიღონ კვლევის შედეგებს შემდეგ 4-5 საათის განმავლობაში.
4. მეთოდი თითქმის მთლიანად აუთენტურია. ჩაწერილია მხოლოდ გამონაკლისი შემთხვევა ცრუ-უარყოფითი შედეგი.
5. უნარი იდენტიფიცირება რამდენიმე სახის პათოგენების ერთი ნიმუში მასალა. ეს არა მხოლოდ სიჩქარის პროცესი დიაგნოზი დაავადების, არამედ მნიშვნელოვნად ამცირებს მატერიალური ხარჯები. ხშირად, ექიმი ნიშნავს ყოვლისმომცველი ანალიზი PCR. ფასი კვლევა, რომელიც შედგება განსაზღვრის ექვსი პათოგენების, დაახლოებით 1500 რუბლი.

რეკომენდაციები მზადება ანალიზი

შედეგები უნდა იყოს ძალაში PCR კვლევების უნდა ტესტირება, შემდეგ რეკომენდაციებს წინასწარი მზადება დიაგნოზი:

1. სანამ მიწოდების ნერწყვის თავი უნდა შეიკავოს ჭამა და ნარკოტიკების 4 საათით ადრე შერჩევის მასალა. უშუალოდ პროცედურის შემდეგ, rinse თქვენი პირში ადუღებულ წყალში.
2. ზემოთ წესები უნდა იხელმძღვანელოს და როდესაც აღების ნიმუში შიგნით cheek. მას შემდეგ, რაც გავლება რეკომენდირებულია განახორციელოს მსუბუქი მასაჟი კანზე გათავისუფლების ჯირკვლის სეკრეტში.
3. შარდის ჩვეულებრივ შეგროვებული სახლში. ამისათვის, თქვენ უნდა ჩაატაროს საფუძვლიანი ტუალეტის სასქესო ორგანოები. სტერილურ პლასტმასის კონტეინერი აუცილებელია შეაგროვოს 50-60 მლ შარდის. ეს არის რეკომენდირებული ქალებისათვის ჩადეთ ტამპონის საშოში და მამაკაცი მაქსიმალურად უნდა გაიყვანოს კანის ჯერ, რათა უზრუნველყოს სისუფთავის მასალა. არ შეიძლება მატერიალური დროს menses.
4. მიწოდების სპერმის შეიკავოს სქესობრივი დროს 3 დღით ადრე კოლექცია მასალა. გარდა ამისა, ექიმები ურჩია უარი თქვას გამოყენება საუნა და ცხელი აბაზანა, ალკოჰოლის და ცხარე საკვები. იყიდება 3 საათით ადრე ანალიზი აუცილებელია, თავი შეიკავონ მოშარდვის.
5. გავლა უროგენიტალური ნაცხის, მაგალითად, იმ შემთხვევაში, თუ ანალიზი წლის chlamydia PCR, ქალებსა და მამაკაცებს რეკომენდირებულია, რომ სექსუალური დანარჩენი 3 დღის განმავლობაში. 2 კვირით ადრე ანალიზი ვერ მიიღებს ანტიბიოტიკების მიმართ. ერთი კვირის განმავლობაში, თქვენ უნდა შეწყვიტოს გამოყენებით ინტიმური ლარით, მალამოები, ვაგინალური სანთლები, douching. 3 საათით ადრე შესწავლა თავი უნდა შეიკავოს მოშარდვის. მენსტრუაციის დროს ღობის მასალა არ ხორციელდება, მხოლოდ 3 დღის შემდეგ შეწყვეტის spotting შეუძლია უროგენიტალური ნაცხი.

PCR ორსულობის

ელოდება პერიოდში ბავშვი, ბევრი ინფექციური დაავადებები, სქესობრივი გზით გადამდები დაავადებები, რომლებიც უკიდურესად სახიფათო ნორმალური ნაყოფის განვითარებაზე. სქესობრივი გზით გადამდები დაავადებების შეიძლება გამოიწვიოს ნაყოფის განვითარება, მუცლის მოშლის ან ნაადრევი მშობიარობა, თანდაყოლილი მანკები ბავშვი. აქედან გამომდინარე, მნიშვნელოვანია, რომ ორსულობის ადრეულ სკრინინგის PCR. სასწრაფოდ ანალიზი აუცილებელია რეგისტრაციისას - მდე 12 კვირის განმავლობაში.

ღობე მასალა მოდის საშვილოსნოს ყელის არხის სპეციალური ჯაგრისები. პროცედურა უმტკივნეულოდ და საფრთხეს არ უქმნის ბავშვი. ჩვეულებრივ ორსულობის ანალიზი Chlamydia PCR მეთოდით, აგრეთვე ureaplasmosis, mycoplasmosis, ციტომეგალოვირუსი, ჰერპესი, პაპილომავირუსის. ასეთი შემოწმების კომპლექსი ე.წ. PCR 6.

PCR დიაგნოზი აივ

იმის გამო, რომ მეთოდი პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია არის ძალიან მგრძნობიარე ცვლილებები ორგანოს და პირობები დიაგნოზი, მრავალი ფაქტორი შეიძლება გავლენა იქონიოს შედეგზე. ამიტომ PCR ანალიზი აივ ინფექცია არ არის საიმედო მეთოდი, მისი ეფექტურობა - 96-98%. დარჩენილი 2-4% ტესტი აძლევს ცრუ დადებითი შედეგები.

მაგრამ ზოგიერთ სიტუაციაში გარეშე PCR დიაგნოზი აივ ვერ გააკეთებს. როგორც წესი, ეს ხორციელდება, რათა ადამიანებს ცრუ-უარყოფითი ELISA. ეს მაჩვენებელი მიუთითებს, რომ პირი არ არის განვითარებული ანტისხეულების ვირუსი და არ შეიძლება აღმოჩენილი გარეშე რაოდენობის გაზრდა მრავალი. რომ ეს მიიღწევა ჩატარების სისხლში PCR მეთოდით.

გარდა ამისა, საჭიროა დიაგნოზის ბავშვები პირველ წელს ცხოვრების, დაიბადა აივ დადებითი დედები. მეთოდი არის ერთადერთი გზა, რათა საიმედოდ სტატუსის განსაზღვრა ბავშვი.

PCR დიაგნოზი ჰეპატიტი

პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდი საშუალებას იძლევა გამოვლენის დნმ ვირუსი ჰეპატიტი A, B, C, სანამ ფორმირების ანტისხეულების ინფექციის ან სიმპტომია დაწყების. განსაკუთრებით ეფექტურია PCR ანალიზი C ჰეპატიტი, მას შემდეგ, რაც 85% ასეთი დაავადების უსიმპტომო და გარეშე დროული მკურნალობა ხდება ქრონიკული.

დროული გამოვლენის გამომწვევის ხელს შეუწყობს თავიდან ავიცილოთ გართულებები და ხანგრძლივ მკურნალობას.

ინტეგრირებული PCR ჩვენება

ყოვლისმომცველი PCR ანალიზი: რა არის ეს? ეს სკრინინგის მეთოდი polimezarnoy ჯაჭვური რეაქცია, რომელიც მოიცავს განსაზღვრის ერთდროულად რამდენიმე სახეობის ინფექციის: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, ციტომეგალოვირუსი, Ureaplasma urealitikum, ჰერპესი 1 და მე -2 ტიპის, გონორეა პაპილომავირუსის. ფასი ამ დიაგნოზის მერყეობს 2,000 3,500 რუბლი. დამოკიდებულია კლინიკა, მასალები და ტექნიკა, ისევე როგორც ტიპის ანალიზი: ხარისხობრივი ან რაოდენობრივი. რა არის საჭირო თქვენს შემთხვევაში - ექიმი გადაწყვეტს. ზოგიერთ შემთხვევაში, თქვენ უბრალოდ აღმოაჩინოს თანდასწრებით გამომწვევის სხვები, როგორიცაა აივ, მნიშვნელოვანი როლი ითამაშა რაოდენობრივი ტიტრის. მოხსენიებული, როგორც "PCR ანალიზი 12" დიაგნოზი ყველა ზემოთ პათოგენების გამოკვლევა.

გაშიფრვა ანალიზის შედეგები

Transcription PCR ანალიზი მარტივია. არსებობს მხოლოდ 2 ინდექსი მასშტაბის - "დადებითი" და "უარყოფითი". შემჩნევისთანავე გამომწვევის შეიძლება ექიმების 99% ნდობის -ე დაადასტუროს ყოფნა დაავადება და დაიწყოს მკურნალობა პაციენტი. რაოდენობრივი მეთოდი განსაზღვრის ინფექციის შესაბამის სვეტი ინდექსის რაოდენობა აღმოჩენილი ბაქტერიების დაზუსტდება. მხოლოდ ექიმს შეუძლია დადგინდეს, რამდენად დაავადების და განსაზღვრონ საჭირო მკურნალობა.

ზოგიერთ შემთხვევაში, მაგალითად განსაზღვრის აივ-ინფექციის PCR, უარყოფითი შედეგი, არ არის საჭირო დამატებითი კვლევები ადასტურებენ, რომ ეს ფიგურები.

სად ტესტირება?

სად გაივლის-PCR ანალიზი საჯარო კლინიკის ან კერძო ლაბორატორიაში? სამწუხაროდ, მუნიციპალური სამედიცინო დაწესებულებების ტექნიკა და მეთოდები ხშირად მოძველებულია. ამიტომ უმჯობესია უპირატესობას ანიჭებს კერძო ლაბორატორიები თანამედროვე აპარატურითა და მაღალკვალიფიციური პერსონალი. გარდა ამისა, კერძო კლინიკაში თქვენ მიიღებთ შედეგები ბევრად უფრო სწრაფად.

მოსკოვში, ბევრი კერძო ლაბორატორიები გთავაზობთ PCR ანალიზი სხვადასხვა ინფექციების. მაგალითად, ასეთ კლინიკებში, როგორც "Vita", "ინტეგრირებული კლინიკა", "ბედნიერი ოჯახი", "Uro-Pro", განახორციელა PCR ანალიზი. გამოკითხვა ფასი 200 რუბლი. განსაზღვრის გამომწვევის.

შეიძლება ითქვას, რომ დიაგნოზი ინფექციური დაავადებების PCR უმეტეს შემთხვევაში არის სწრაფი და საიმედო გზა გამოვლენის გამომწვევის ორგანიზმში ადრეულ ეტაპზე ინფექციის. თუმცა, გარკვეულ შემთხვევებში, აირჩიოს სხვა მეთოდები დიაგნოზი. განსაზღვრა, რომ საჭიროა ისეთი სასწავლო შეიძლება იყოს მხოლოდ სპეციალისტი. PCR ანალიზი დეშიფრაციის ასევე მოითხოვს პროფესიონალურ მიდგომას. დაიცვას თქვენი ექიმის რჩევებს და არ მისცეს საკუთარი ტესტი, რომელიც არ არის საჭირო.